血清培养基如何灭菌
提示:
培养基制作后为何要灭菌
提示:
血清培养基如何灭菌
1、未加血清的培养基叫做"基础培养基",先把基础培养基灭菌,凉至45-50度(可以放在水浴锅内,温度可以按培养基的说明掌握),备用。
2、你所加的血清要保证是无菌的,如果你是直接购买成品血清那一般不会有问题,如果是自己找来的血清需要滤过除菌,或者采血及分离血清全程严格的无菌操作,不过这些操作都太麻烦了,不如直接买市售的血清。
3、按你所配培养基需要加血清的量,把准备好的基础培养基瓶口在无菌室酒精灯上方加入足够的血清(也就是无菌操作了),盖好,充分混匀。
4、趁琼脂未凝固,倾注平板(当然,平板是无菌处理过的),每平皿15ml左右。
5、冷却凝固后,翻转平板,进行无菌检验(证明培养基是没有被细菌污染的),之后就可以正常使用了。
培养基制作后为何要灭菌
培养基配制完成后,必须立即灭菌原因是防止细菌污染培养基。一旦细菌污染了培养基,由于培养基有丰富的营养物质,细菌会段时间内大量产生,就会跟培养物争夺营养物质,另一方面,细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡,若不能即时灭菌必须重新进行无菌无毒操作。 一般在比较成熟的情况下,会在培养基高压蒸汽灭菌前调高一定的pH值,以便适应灭菌后pH值下降的问题,具体调高多少可根据自身实验摸索。 扩展资料: 分装时要掌握好分注量,多了即浪费又减小培养物的生长空间;少了又会因营养不足而影响生长,一般以占培养容器1/4 - 1/3左右为宜,培养基在培养容器中的厚度约为1.5cm。 分装时要注意不要将培养基沾到管壁上,以免引起污染。分装后立即塞上棉塞或者盖上瓶盖或封好封口膜,并在培养瓶上贴标签或用记号笔在瓶壁上作好标注,然后进行灭菌。